生物素-乳酸氧化酶Biotin-Lactate Oxidase(Biotin-LOX)黄素氧化酶功能探针
一、基础信息与理化性质
中文名称:生物素 - 乳酸氧化酶
英文名称:Biotin-Lactate Oxidase(Biotin-LOX)
母体来源:Aerococcus viridans(常用),CAS:9028-72-2
单体分子量:~42 kDa;天然活性形式:同源四聚体~160 kDa
物质组成:该复合物由生物素(Biotin)与乳酸氧化酶(LOX)通过化学偶联形成。乳酸氧化酶是一种黄素依赖性酶,能够催化乳酸氧化生成丙酮酸和过氧化氢(H₂O₂)。
结构式:
二、核心合成与功能特性
温和化学偶联:其合成路线通常基于蛋白质氨基的酰化反应。利用活化生物素(如 NHS-Biotin),在温和的缓冲体系(pH 7–8)中与乳酸氧化酶表面的赖氨酸 ε-氨基发生亲核加成-取代反应,形成稳定的酰胺键。
- 双重功能协同:
- 催化功能:保留了乳酸氧化酶对乳酸的高度特异性识别及氧化还原活性。
- 靶向亲和能力:生物素基团可与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)发生极高亲和力的非共价结合(解离常数 Kd 约为 10⁻¹⁵ M),实现酶分子的定向固定与信号放大。
三、科研应用领域
化学蛋白质组学|亲和 Pull-down 靶点筛选
肿瘤微环境代谢研究
乳酸信号通路机制研究
生物传感与分析平台构建
体外分子互作验证
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