Biotinyl-Pancreatic Polypeptide (human)
一、基础信息
- 中文名称:N 端生物素修饰人源胰腺多肽
- 英文全称:Biotinyl-Pancreatic Polypeptide (human)
- 三字母序列:Biotin-Ala-Pro-Leu-Glu-Pro-Val-Tyr-Pro-Gly-Asp-Asn-Ala-Thr-Pro-Glu-Gln-Met-Ala-Gln-Tyr-Ala-Ala-Asp-Leu-Arg-Arg-Tyr-Ile-Asn-Met-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH₂
- 单字母序列:Bio-APLEPVYPGDNATPEQMAQYAAELRRYINMLTRPRY-NH₂
- 氨基酸总数:36 aa
- 分子式:C185H287N53O54S2
- 分子量:4181.77
- 结构修饰说明
- N 端修饰:Biotin(简写 Bio,生物素酰基);
- C 端酰胺化 -NH₂,封闭羧基末端;
- 无焦谷氨酸、二硫键、环化、乙酰、侧链定点修饰;
- 结构式:
二、理化性质
1.紫外定量:含多处 Tyr、2 个 Met,280 nm 紫外吸收强,可直接紫外分光光度法定量。
2.稳定性重点
- 含双 Met 甲硫氨酸,极易氧化失活;溶解、分装全程冰浴、减少空气暴露,长期储存冻干粉充氮气隔氧;
- Tyr 属于光敏残基,所有操作、储存全程避光;
- 序列富含 Pro 形成刚性脯氨酸转角;N 端 Bio、C 端酰胺两端封闭,大幅抵抗氨基肽酶 / 羧肽酶水解;长链多肽易被内肽酶剪切,工作液建议现配现用。
3.酸碱特性
酸性残基:Glu、Asp;碱性残基:Arg;整体偏弱酸性;适配 pH 6.0–7.4 PBS、人胰腺细胞培养基、人血浆模拟缓冲液。
4.溶解性
Thr、Asn、Gln 大量亲水残基搭配带电酸碱氨基酸,水溶性优异,中性缓冲液常温完全溶解。
5.空间构象
多 Pro 柔性中间区段,C 端形成保守 α 螺旋,C 端 Tyr-NH₂是 NPY 家族 Y 受体核心识别位点;N 端生物素远离受体结合口袋,不影响多肽与膜受体结合亲和力。
三、来源背景
人胰腺多肽(hPP),胰腺 PP 细胞分泌,属于 NPY 家族胃肠内分泌肽;N 端偶联生物素作为亲和探针,专门用于人源细胞、人体组织 Y 受体互作、结合竞争实验,规避啮齿类序列物种差异干扰。
四、生物学功能
- 高亲和力结合人 Y4/Y5 受体,抑制胰腺外分泌、胆囊收缩、胃肠蠕动;
- 调控食欲、能量代谢、胃肠道激素释放,参与人体饱腹感调节;
- 抑制迷走神经介导的消化通路信号;
- 生物素标签可特异性结合链霉亲和素,用于 Pull-down 捕获膜受体及互作蛋白、荧光 / 酶标示踪受体分布。
五、科研应用
- 人源细胞 Pull-down,富集 Y 受体及下游结合蛋白;
- 人 Y 受体激动剂 / 拮抗剂体外筛选、竞争性结合实验;
- 人体消化代谢、肥胖、胰腺功能相关体外细胞模型;
- 人 / 大鼠胰腺多肽序列、受体亲和力对比构效实验;
- 免疫荧光、化学发光示踪人源受体内吞与组织分布。
六、溶解与储存规范
- 溶解:pH7.2 无菌 PBS 冰浴避光配制,缩短敞口时间防止 Met 氧化;
- 冻干粉:短期 - 20 ℃避光密封;长期分装充氮气隔氧,-80 ℃避光储存;
- 工作液:单次分装避免反复冻融;2~8 ℃避光存放不超过 3–5 天。
