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Ecdysis-Triggering Hormone (Manduca sexta) (Mas-ETH)

一、基础信息

  • 中文名称:烟草天蛾蜕皮触发激素(Mas-ETH)
  • 英文全称:Ecdysis-Triggering Hormone from Manduca sexta,Mas-ETH
  • 三字母序列:Ser-Asn-Glu-Ala-Ile-Ser-Pro-Phe-Asp-Gln-Gly-Met-Met-Gly-Tyr-Val-Ile-Lys-Thr-Asn-Lys-Asn-Ile-Pro-Arg-Met
  • 单字母序列SNEAISPFDQGMMGYVIKTNKNIPRM
  • 氨基酸总数:26 aa
  • 分子式:C127H206N36O38S3
  • 分子量:2941.44
  • 结构修饰:线性多肽,C 端酰胺化 (-NH₂),无环化、无二硫键、无 N 端乙酰修饰;C 端酰胺为维持生理活性必需结构。
  • 结构式

二、理化性质

  1. 紫外定量:含 Phe、Tyr,280 nm 有紫外吸收,可紫外分光光度法标定浓度,无需 BCA 等显色定量。
  2. 稳定性:序列含三处 Met(双连续 Met + 末端 Met),甲硫氨酸极易被氧化失活;Phe、Tyr 为光敏残基,配液、储存全程避光、隔氧,避免空气接触。无半胱氨酸,不存在二硫键断裂风险。
  3. 酸碱特性:酸性残基 Glu、Asp;碱性残基 Lys、Arg;中性极性 Asn、Gln、Ser、Thr 并存,整体等电点趋近生理中性,pH7.0~7.5 环境稳定性最优,适配 pH7.2 PBS、昆虫生理缓冲液。
  4. 溶解性:大量 Ser、Thr、Asn、Gln 亲水极性残基,带电氨基酸丰富,水溶性优异,纯水、中性缓冲液常温易溶;高浓度配制不明显析出。
  5. 空间构象:序列两处 Pro 引入肽链特征转角,多 Gly 提升链段柔性,溶液以无规卷曲 + 局部转角构象为主,结合靶受体时发生构象折叠。

三、来源背景

天然内源神经多肽,分离自鳞翅目烟草天蛾(Manduca sexta)腹神经内分泌器官,是昆虫蜕皮级联调控关键内分泌激素,在昆虫蜕皮生理通路处于上游调控位置,同类 ETH 肽广泛存在于蛾类、蝇类、蚊类等节肢动物。

四、生物学功能

  1. 启动蜕皮生理程序:作用于中枢及外周神经内分泌受体,级联诱导蜕皮相关激素释放,触发昆虫预蜕皮、蜕皮全过程肌肉节律性收缩,完成旧表皮蜕离。
  2. 调控内分泌信号通路:协同 EH(蜕皮激素)、CCAP 等多种神经肽,串联调控昆虫蜕皮激素、保幼激素合成与释放,协同调控发育时序。
  3. 调节消化道与体壁肌肉活动:诱导消化道蠕动、表皮肌肉规律性收缩,保障蜕皮时体液循环与表皮剥离。
  4. 参与昆虫羽化调控:蛹→成虫羽化阶段高表达,是成虫破蛹羽化必不可少的信号肽。

五、科研应用

  1. 昆虫生理与发育生物学:昆虫蜕皮、变态发育机制体外体内诱导实验,外源注射 Mas-ETH 可人工诱导提前蜕皮。
  2. 农药靶点研发:靶向 ETH 受体开发昆虫生长调节剂、新型绿色生物农药,干扰害虫正常蜕皮致畸形死亡。
  3. 无脊椎动物神经肽受体药理:ETH 受体激动剂阳性对照,用于昆虫 GPCR 受体筛选、配体结合、钙流功能试验。
  4. 不同物种 ETH 同源肽构效对比:果蝇、蚊、蛾源 ETH 序列比对,明确保守活性基序。

六、溶解与储存规范

  1. 溶解配制:优选无菌昆虫生理盐水或 pH7.2 PBS 低温冰浴溶解,全程避光、尽量除氧,减少 Met 氧化。
  2. 冻干粉保存:短期 1~3 个月密封避光 - 20 ℃;长期分装后 - 80 ℃避光密封,充氮气保存显著延长保质期。
  3. 工作液:单次实验小体积分装,禁止反复冻融;水溶液 2~8 ℃避光储存不超过 3 天。
http://www.gsyq.cn/news/1463531.html

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